روش های استخراج نماتد ها
استخراج نماتدها از خاك:
روش قيف بيرمن:
در اين روش انتهاي قيف را لوله لاستيكي قرار ميدهند و داخل آن را آب مي‌ريزند و بعد نمونه خاك را روي يك دستمال كاغذي مي‌ريزند و آنر به آرامي داخل آب قرار ميدهند وبعد از 24ساعت نماتدهاي فعال در ته لوله لاستيكي جمع ميشوند(بعلت نبوداكسيژن درته لوله بسياري از نماتدها بصورت غيرفعال درآمده يا مي‌ميرند)
جدا كردن نماتدها به روش سانتريفوژ:
در اين روش 400 گرم ازخاك مورد نظر را با 700 سي سي آب مخلوط مي‌كنند وآنرا از الك 40 مش عبور ميدهند. اينكار را سه بار انجام ميدهند، بقاياي باقي مانده روي الك را دور مي ريزيم آبي را كه ازالك 40عبور داده با الک هاي 100،200،325 و400صاف مي کنيم.بقاياي باقي مانده داخل الک ها را با مقداري آب شسته و داخل يك بشر جمع‌اوري ميكنيم (آبي كه ازالك 400 عبور كرده دور مي‌ريزيم) و آنرا داخل يك مزور مي‌ريزيم. مزور را به مدت نيم ساعت به حال خود رها ميكنيم تا نماتدها ته نشين شوند ومواد مزاحم روي اب جمع شوند بالايي را خالي ميكنيم و پاييني راكه حاوي نماتد است به خوبي هم مي‌زنيم و داخل لوله‌هاي سانتريفوژ مي‌ريزيم لوله ها را كه2 به 2 به اندازه مساوي پرشده‌اند در دستگاه مقابل هم قرار مي‌دهيم ودستگاه را با دور 4000 دور دردقيقه به مدت 7 دقيقه روشن ميكنيم بعد قسمتهاي تفكيك شده شامل يك قسمت آب و يك قسمت گل مي‌باشد. قسمت آب را بيرون مي ريزيم و محلول(شكر با وزن مخصوص 8/1) را به لوله اضافه ميكنيم و خوب تكان مي دهيم اين دستگاه را براي يك دقيقه و 1000 دور در دقيقه تنظيم ميكنيم بعد از اين در لوله‌ها دو فازجدا ازهم تشكيل شده كه قسمت بالايي را در روي الك 400 مش مي‌ريزيم و به خوبي با آب شستشو مي دهيم (شكر مي‌تواند نماتدها را خراب كند) حالا موادي را كه روي الك باقي مي ماند در يك پتري جمع ميكنيم ومطالعه مي كنيم.
استخراج سيست هاي هترودرا(Heterodera) از خاك:
نمونه خاك را پس از جمع‌آوري و خشك كردن خوب نرم كرده وباهم مخلوط مي‌كنند سپس مقدار 100 گرم ازآانرا برداشته و با الك 175 ميكروني الك مي‌كنند. محتويات الك را دريك كاسه سفيد لبه دار پر آب مي‌ريزند سيست‌ها به سطح آب آمده و لبه كاسه جمع ميشوند كه مي توان با استفاده از يك قلموي كوچك آنها را جمع‌آوري كرد.
جداكردن نماتدها از ريشه يا ساير اندام گياهي
اندام آلوده ريشه يا ساقه را به كمك آسياب هاي برقي به اندازهاي حدود نيم سانتيمتريا كمتر خرد مي‌كنند سپس نماتدها را به كمك قيف برمن ،الك،يا سانتريفوژ جدا مي كنند.
اگر بافت هاي گياهي خرد شده را در يك پتري ريخته با اضافه نمودن مقداري آب خيس كنيم پس از 24 ساعت از بافت هاي آلوده نماتدها خارج ميشوند و در آب شناور ميشوند.
منبع:
گیاهپزشکی ۱۱۰